有了質(zhì)量好的抗原,還必須選擇適當(dāng)?shù)拿庖咄緩?,才能?strong>
抗體制備質(zhì)量好(特異性強和效價高)的抗體。今天我們來看看佐劑的配制:
由于不同個體對同一抗原的反應(yīng)性不同,而且不同抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)的能力也有強有弱,因此常常在注射抗原的同時,加入能增強抗原的抗原性物質(zhì),以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫反應(yīng),這種物質(zhì)稱為免疫佐劑。
佐劑除了延長抗原在體內(nèi)的存留時間,增加抗原刺激作用外,更主要的是,它能刺激網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng),使參與免疫反應(yīng)的免疫活性細胞增多,促進T細胞與B細胞的相互作用,從而增強機體對抗原的細胞免疫和抗體的產(chǎn)生。
常用的佐劑是福氏佐劑,其成分通常是羊毛脂1份、石臘油5份,羊毛脂與石臘油的比例,視需要可調(diào)整為:2-9(V/V),這是不*福氏佐劑,在每毫升不*佐劑加入1-20mg卡介苗就成為*佐劑。
具體配制方法:
按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內(nèi),用超聲波使之混勻,高壓滅菌,置4℃下保存?zhèn)溆?。免疫前取等容積*或不*佐劑與免疫原溶液混合,用振蕩器混勻成乳狀,也可以在免疫前取需要量佐劑置乳缽中研磨,均勻后再邊磨邊滴加入等容積抗原液(其中加卡介苗3-4mg/ml或不加),加完后再繼續(xù)研磨成乳劑,滴于冰水上5-10min內(nèi)*不擴散為止。為避免損失抗原,亦可用一注射器裝抗原液,另一注射器裝佐劑,二者以聚乙烯塑料管連接,然后二者來回反復(fù)抽吸,約數(shù)十分鐘后即能*乳化。檢查合格后即以其中一注射器作注射用。