技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES重組蛋白的表達(dá)系統(tǒng)是用于生產(chǎn)重組蛋白的生物技術(shù)平臺(tái),每種系統(tǒng)都有其特定的優(yōu)勢和局限性。以下是幾種主要的重組蛋白表達(dá)系統(tǒng):
原核表達(dá)系統(tǒng):
大腸桿菌(Escherichia coli):常用的原核表達(dá)系統(tǒng),具有遺傳背景清晰、培養(yǎng)簡單、成本低廉等優(yōu)點(diǎn)。但大腸桿菌不能進(jìn)行復(fù)雜的翻譯后修飾。
枯草桿菌:具有蛋白分泌能力強(qiáng)、遺傳特性強(qiáng)等優(yōu)勢,但重組表達(dá)質(zhì)粒在枯草桿菌中穩(wěn)定性較差。
真核表達(dá)系統(tǒng):
酵母:如釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe),具有翻譯后加工能力,適合于表達(dá)真核蛋白。
昆蟲/桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng):能夠?qū)φ婧说鞍走M(jìn)行翻譯后加工,適用于表達(dá)復(fù)雜蛋白,但存在表達(dá)周期長、成本高等缺點(diǎn)。
哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng):如CHO細(xì)胞、HEK293細(xì)胞等,能夠進(jìn)行與人類相似的翻譯后修飾,適合表達(dá)需要復(fù)雜糖基化等修飾的蛋白。
其他真核表達(dá)系統(tǒng):
絲狀真菌:如曲霉菌屬(Aspergillus),可用于生產(chǎn)某些特殊類型的重組蛋白。
植物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng):利用植物的葉綠體或細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行蛋白表達(dá),適用于生產(chǎn)口服疫苗等。
分泌型表達(dá)系統(tǒng):
某些表達(dá)系統(tǒng)允許目標(biāo)蛋白分泌到培養(yǎng)基中,便于蛋白的純化和回收。
融合蛋白表達(dá)系統(tǒng):
利用融合蛋白技術(shù),將目標(biāo)蛋白與某些具有溶解性或穩(wěn)定性的蛋白質(zhì)(如GST、MBP等)融合,以提高目標(biāo)蛋白的可溶性和穩(wěn)定性。
無細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng):
在無細(xì)胞體系中進(jìn)行蛋白表達(dá),可以快速生產(chǎn)蛋白,尤其適用于難以在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的膜蛋白或毒素蛋白。
穩(wěn)定細(xì)胞株表達(dá)系統(tǒng):
通過基因工程手段將目標(biāo)蛋白基因整合到宿主細(xì)胞的基因組中,形成穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株,用于長期生產(chǎn)蛋白。
選擇哪種表達(dá)系統(tǒng)取決于所需蛋白的特性、表達(dá)量、所需的翻譯后修飾類型、成本和生產(chǎn)規(guī)模等因素。科研人員通常會(huì)根據(jù)目標(biāo)蛋白的特性和實(shí)驗(yàn)需求選擇最合適的表達(dá)系統(tǒng)。
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