單抗制備技術是現代生物醫(yī)藥領域的一個重大突破，它不僅提高了抗體藥物的療效和安全性，也為疾病的診斷和研究提供了強大的工具。隨著科技的進步，其應用范圍還在不斷擴大，未來有望帶來更多創(chuàng)新的治療手段和診斷方法，它被廣泛應用于免疫分析、疾病治療以及生物學基礎研究等領域。下面將詳細介紹的選購及操作指南：
 

　　單抗制備方法：
 

　　1.動物免疫
 

　　-選擇動物種類：根據所需抗體的用途和量來決定動物種類。量大時可選擇羊、馬等大動物；量少時家兔、豚鼠等小動物更為合適。
 

　　-制定免疫方案：根據抗原特性選擇合適的免疫方案，可溶性抗原通常需要加入佐劑以增強免疫反應。
 

　　2.抗原制備與注射
 

　　-抗原處理：抗原需與佐劑等體積混合并研磨成乳糜狀，以優(yōu)化免疫反應的效率和效果。
 

　　-注射劑量與途徑：初次免疫通常使用50ug抗原進行皮下多點注射，之后間隔3周進行第二次免疫。
 

　　3.細胞融合與篩選
 

　　-融合過程：將免疫動物的脾細胞與骨髓瘤細胞融合，獲得雜交瘤細胞。
 

　　-篩選雜交瘤細胞：通過特定的篩選方法，識別出能夠分泌目標抗體的陽性單克隆雜交瘤細胞，并進行擴大培養(yǎng)。
 

　　4.抗體檢測與克隆化
 

　　-單抗檢測：對分泌的抗體進行鑒定，確認其特異性和親和力等屬性，確保所產抗體符合實驗或臨床需求。
 

　　-克隆化：陽性的雜交瘤細胞需要進行克隆化，以確保獲得穩(wěn)定分泌特定抗體的細胞克隆。
 

　　5.抗體的生產與純化
 

　　-生產：通過體外培養(yǎng)克隆化的雜交瘤細胞，實現大量抗體的生產。
 

　　-純化：利用各種生物化學技術，如蛋白A/G親和層析，以提高抗體的純度和質量，滿足后續(xù)實驗或臨床應用的需求。