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單克隆抗體制備技術(shù)的應(yīng)用案例

更新時間:2022-05-17點擊次數(shù):1533
  單克隆抗體制備是相對于多克隆抗體而言的。單克隆抗體指由單一的漿細胞克隆所產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一抗原表位的抗體。當機體受到抗原刺激后,B淋巴細胞被抗原決定簇激活,增殖分化出大量的漿細胞,而后由漿細胞分泌出特異性抗體。1957年,生物學(xué)家伯內(nèi)特提出了克隆選擇學(xué)說:動物的每個B淋巴細胞都有其*的受體,在受到外界抗原刺激時,特定的B細胞會發(fā)生免疫反應(yīng),迅速增殖分化產(chǎn)生相應(yīng)抗體,抵御抗原的入侵。
 
  隨后,人們發(fā)現(xiàn)無論是在體內(nèi)的腫瘤細胞還是移植到體外培養(yǎng)的腫瘤細胞都具有無限傳代的特點,1975年,英國科學(xué)家將壽命長但不能產(chǎn)生特異性抗體的小鼠骨髓瘤細胞與壽命短但經(jīng)免疫后可產(chǎn)生特異性抗體的漿細胞在體外進行融合,創(chuàng)建了雜交瘤技術(shù)。該技術(shù)所產(chǎn)生的雜交瘤細胞既可以分泌我們所需的特異性抗體,又具有癌細胞無限繁殖的能力。
 
  單克隆抗體制備技術(shù)的應(yīng)用:
  1.檢驗醫(yī)學(xué)診斷試劑
  作為檢驗醫(yī)學(xué)實驗室的診斷試劑,單克隆抗體以其特異性強、純度高、均一性好等優(yōu)點,廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗、放射免疫分析、免疫組化和流式細胞儀等技術(shù)。并且單克隆抗體的應(yīng)用,很大程度上促進了商品化試劑盒的發(fā)展。應(yīng)用單克隆抗體制作的商品化試劑盒廣泛應(yīng)用于:①病原微生物抗原、抗體的檢測;②腫瘤抗原的檢測;③免疫細胞及其亞群的檢測;④激素測定;⑤細胞因子的測定。
  2.蛋白質(zhì)的提純
  單克隆抗體是親和層析中重要的配體。將單克隆抗體吸附在一個惰性的固相基質(zhì)上,并制備成層析柱。當樣品流經(jīng)層析柱時,待分離的抗原可與固相的單克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合,其余成分不能與之結(jié)合。將層析柱充分洗脫后,改變洗脫液的離子強度或pH,與分離的抗原與抗體解離,收集洗脫液便可得到欲純化的抗原。
  3.腫瘤的導(dǎo)向治療和放射免疫顯像技術(shù)
  將針對某一腫瘤抗原的單克隆抗體與化療藥物或放療物質(zhì)連接,利用單克隆抗體的導(dǎo)向作用,將藥物或放療物質(zhì)攜帶至靶器官,直接殺傷靶細胞,稱為腫瘤導(dǎo)向治療。另外,將放射性標記物與單克隆抗體連接,注入患者體內(nèi)可進行放射免疫顯像,協(xié)助腫瘤的診斷。
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