單克隆抗體(Monoclonal Anti bodies,簡(jiǎn)稱(chēng)mAbs或單抗)是一種高度特異性的免疫球蛋白,由同一種B淋巴細(xì)胞克隆產(chǎn)生的,能夠識(shí)別和結(jié)合到特定的抗原上。單抗制備技術(shù)是一項(xiàng)重要的生物技術(shù),它允許科學(xué)家和醫(yī)生生產(chǎn)出大量具有高度一致性和特異性的抗體,這些抗體可以用于診斷、治療和研究各種疾病。
單抗制備的過(guò)程:
1.抗原選擇與動(dòng)物免疫:選擇一個(gè)目標(biāo)抗原,這個(gè)抗原可以是病原體的一個(gè)部分,如病毒的一個(gè)蛋白質(zhì),或者是人體中與某種疾病相關(guān)的蛋白質(zhì)。將這個(gè)抗原注射到小鼠或其他動(dòng)物體內(nèi),以激發(fā)其免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體。
2.細(xì)胞融合與雜交瘤產(chǎn)生:從免疫后的動(dòng)物體內(nèi)取出產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞,并與骨髓瘤細(xì)胞(一種癌細(xì)胞,能在體外無(wú)限增殖)進(jìn)行融合,形成雜交瘤細(xì)胞。這種細(xì)胞既保留了B細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的能力,又具有腫瘤細(xì)胞無(wú)限增殖的特性。
3.篩選與克?。簩⒌玫降碾s交瘤細(xì)胞分離并培養(yǎng)在多孔板中,每個(gè)孔中的細(xì)胞都來(lái)自于一個(gè)單一的雜交瘤細(xì)胞。通過(guò)檢測(cè)每個(gè)孔中細(xì)胞分泌的抗體,篩選出能產(chǎn)生目標(biāo)單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。
4.擴(kuò)增與純化:將篩選出的雜交瘤細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng),收集培養(yǎng)液中的單克隆抗體,并進(jìn)行純化處理,得到高純度的單克隆抗體。
單抗制備的作用:
1.診斷:?jiǎn)慰寺】贵w因其高度的特異性,被廣泛用于疾病的診斷測(cè)試中。例如,用于檢測(cè)HIV、乙型肝炎等病毒感染的快速診斷試劑盒就是基于單克隆抗體的。
2.治療:?jiǎn)慰寺】贵w作為治療藥物,可以準(zhǔn)確靶向病變細(xì)胞或病原體,減少對(duì)正常細(xì)胞的傷害。例如,用于治療某些癌癥的赫賽汀(Herceptin)和用于治療自身免疫性疾病的雷米卡德(Remicade)都是單克隆抗體。
3.研究工具:在生物學(xué)研究中,單克隆抗體用于識(shí)別和定位蛋白質(zhì),幫助科學(xué)家了解蛋白質(zhì)的功能和相互作用。此外,它們還用于流式細(xì)胞術(shù)、西方印跡、免疫組化等實(shí)驗(yàn)技術(shù)中。
4.藥物開(kāi)發(fā):?jiǎn)慰寺】贵w也被用于藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中,作為藥物靶點(diǎn)的驗(yàn)證工具,幫助確定新藥的潛在效果和安全性。