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PRODUCTS CNTER當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心分子生物學(xué)平臺蛋白-核酸/RNA-DNA研究免疫共沉淀
免疫共沉淀(Co-lmmunoprecipitation) 是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。
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ARTICLES免疫共沉淀(Co-lmmunoprecipitation) 是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相
互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。
其原理是:當(dāng)細胞在非變性條件下被裂解時,完整細胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)間的相互作用被
保留了下來。如果用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X,那么與X在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來。目前多用
精制的prorein A預(yù)先結(jié)合固化在argarose的beads上,使之與含有抗原的溶液及抗體反應(yīng)后,beads. 上的
prorein A就能吸附抗原達到精制的目的。這種方法常用于測定兩種目標(biāo)蛋白質(zhì)是否在體內(nèi)結(jié)合;也可用于
確定一種特定蛋白質(zhì)的新的作用搭檔。
基本流程是:細胞裂解液中加入抗體,與抗原形成特異免疫復(fù)合物,經(jīng)過洗脫,收集免疫復(fù)合物,然
后進行SDS-PAGE及Western blotting分析。
服務(wù)流程:
1.構(gòu)建含有目的基因的表達質(zhì)粒
2.共轉(zhuǎn)細胞
3.裂解細胞并加入誘餌蛋白的抗體,孵育
4.加入protein A或G以與抗體特異性結(jié)合于Agarose珠
5. SDS-PAGE; Western Blot
北京大興亦莊經(jīng)濟開發(fā)區(qū)天驥智谷62號樓603
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