FRET技術(shù)
熒光能量共振轉(zhuǎn)移(Fluorescence resonance energy transfer, FRET)是檢測(cè)活體中生物大分子納米級(jí)
距離和納米級(jí)距離變化的有力工具，在生物大分子相互作用分析、細(xì)胞生理研究、免疫分析等方面有著廣
泛的應(yīng)用。如檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)酶切作用、檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣濃度變化、蛋白質(zhì)磷酸化、蛋白質(zhì)間相互作用、子通
道構(gòu)形變化、受體激活等。
熒光能量共振轉(zhuǎn)移是距離很近的兩個(gè)熒光粉子間產(chǎn)生的一種能量轉(zhuǎn)移現(xiàn)象。當(dāng)供體熒光分子的發(fā)射光
譜與受體熒光分子的吸收光譜重疊，粗兩個(gè)分子的距離在10nm范圍以?xún)?nèi)時(shí)，就會(huì)發(fā)生一種非放射性的
能量轉(zhuǎn)移,即FRET現(xiàn)象,使得供體的熒光強(qiáng)度比它單獨(dú)存在時(shí)要低的多(熒光猝滅)，受體發(fā)射的熒
光卻大大增強(qiáng)(敏化熒光)。
FRET主要可分為分子內(nèi)FRET和分子間FRET:前者指在一個(gè)分子上標(biāo)記兩個(gè)探針,檢測(cè)這個(gè)分子自身
發(fā)生的一些變化;后者指在不同的兩個(gè)分子上分別標(biāo)記供體和受體探針，檢測(cè)這兩個(gè)分子間的相互作用。分
子內(nèi)FRET更穩(wěn)定。