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單克隆抗體制備的基本方法

抗體是機(jī)體在抗原刺激下產(chǎn)生的能與該抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。常規(guī)的抗體制備是通過(guò)動(dòng)物免疫并采集抗血清的方法產(chǎn)生的，因而抗血清通常含有針對(duì)其他無(wú)關(guān)抗原的抗體和血清中其他蛋白質(zhì)成分。一般的抗原分子大多含有多個(gè)不同的抗原決定簇，所以常規(guī)抗體也是針對(duì)多個(gè)不同抗原決定簇抗體的混合物。即使是針對(duì)同一抗原決定簇的常規(guī)血清抗體，仍是由不同B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的異質(zhì)的抗體組成。單克隆抗體制備的基本方法：對(duì)抗原的要求是純度越高越好，尤其是初次免疫所用的抗原。如為細(xì)胞抗原，可取1×107個(gè)細(xì)胞作腹腔免...

單克隆抗體制備是一種均一的免疫球蛋白分子

單克隆抗體制備與多克隆抗體主要的區(qū)別是MAb為單一種B細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的一種均一的免疫球蛋白分子。所以MAb是B細(xì)胞克隆的標(biāo)志，是一種*型的抗體，它的特異性是針對(duì)一個(gè)抗原決定簇的。制備單克隆抗體不能用化學(xué)分離的方法從多克隆抗體中去分離純化得到它，而是用分離產(chǎn)生抗體的B細(xì)胞克隆的方法得到它。單克隆抗體制備原理：常用的單克隆抗體是小鼠的單抗，此外也有大鼠的和人源的單抗。人源單抗制備比較復(fù)雜。小鼠單抗的制備通常是使用Balb/c小鼠的B細(xì)胞和它的骨髓瘤細(xì)胞。大鼠的單抗制備通常用Lou...

技術(shù) | 原核蛋白表達(dá)系統(tǒng)

關(guān)于細(xì)菌表達(dá)——由于其性質(zhì)，細(xì)菌表達(dá)系統(tǒng)是一種理想的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)。它通常是生產(chǎn)重組蛋白和抗體的。到目前為止，許多細(xì)菌已經(jīng)被很好地研究。在大量細(xì)菌中，大腸桿菌和枯草芽孢桿菌細(xì)胞系是**的重組蛋白表達(dá)宿主。它們?cè)谶m宜條件下以極低的成本快速?gòu)?fù)制，而表達(dá)水平高，這種特性使其成為大規(guī)模生產(chǎn)的有效和經(jīng)濟(jì)的方式。他們的基因組已*測(cè)序，遺傳背景和代謝途徑****。另外，由于結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，細(xì)菌比真核生物更容易轉(zhuǎn)染。這些期望的特征使表達(dá)過(guò)程更容易和更快速。但在某些方面，優(yōu)勢(shì)也是不利的。可以在細(xì)菌中...

怎么確定大腸桿菌被噬菌體侵染了呢？

噬菌體（phage）是侵襲細(xì)菌的病毒，也是賦予宿主菌生物學(xué)性狀的遺傳物質(zhì)。噬菌體必須在活菌內(nèi)寄生，有嚴(yán)格的宿主特異性，其取決于噬菌體吸附器官和受體菌表面受體的分子結(jié)構(gòu)和互補(bǔ)性。噬菌體是病毒中尤為普遍和分布廣泛的群體。通常在一些充滿細(xì)菌群落的地方，如：泥土、動(dòng)物的腸道里，都可以找到噬菌體。噬菌體分兩種溫和噬菌體和毒性噬菌體前者不會(huì)讓大腸桿菌死亡但是它的基因會(huì)整合到大腸桿菌中做PCR檢測(cè)一下基因可以確定后者直接讓coil.死亡平板涂布培養(yǎng)板子上會(huì)形成噬斑（plaque）可作為判定...

艾柏森免疫原性評(píng)價(jià)

在臨床前和臨床試驗(yàn)中評(píng)價(jià)免疫原性是生物技術(shù)藥物申請(qǐng)臨床試驗(yàn)和注冊(cè)的重要內(nèi)容。艾柏森生物遵照FDA和EMA的指導(dǎo)原則開發(fā)了SensitiveImmunogenicityAssessmentTechnology®(SIAT)技術(shù)評(píng)價(jià)藥物的免疫原性，包括體內(nèi)研究、離體研究、體外研究及生物信息學(xué)研究方法，可提供經(jīng)驗(yàn)證的檢測(cè)方法、類定量描述藥物誘導(dǎo)的抗體反應(yīng)水平（滴度）、抗體的特性檢測(cè)、抗體產(chǎn)生對(duì)療效、毒性和藥動(dòng)學(xué)的影響等內(nèi)容，并預(yù)測(cè)在人體內(nèi)潛在的免疫原性強(qiáng)弱，為生物技術(shù)藥物的...

安諾倫代理VMRD品牌

VMRD(VeterinaryMedicalResearch&Development)公司是1981年由D.ScottAdams，DVM，PhD創(chuàng)立的，公司位于美國(guó)華盛頓，其產(chǎn)品廣銷國(guó)內(nèi)外，是一家專門從事開發(fā)和制造獸醫(yī)診斷檢測(cè)試劑盒和相關(guān)試劑的公司，提供的產(chǎn)品主要包括診斷試劑盒，熒光試劑盒，抗體，免疫試劑盒等，公司的理念是為客戶提供高質(zhì)量、高效率的產(chǎn)品和服務(wù)，在這樣的理念支撐下公司對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)者，獸醫(yī)疫苗制造商，政府機(jī)構(gòu)，制藥公司和獸醫(yī)工作者在提高動(dòng)物健康方面產(chǎn)生了深遠(yuǎn)的影響。...

抗體&蛋白純化服務(wù)

蛋白純化是利用不同蛋白間內(nèi)在的相似性與差異，利用各種蛋白間的相似性來(lái)除去非蛋白物質(zhì)的污染，而利用各蛋白質(zhì)的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來(lái)。每種蛋白間的大小、形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學(xué)活性都會(huì)有差異，利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來(lái)得到重組蛋白。艾柏森生物可以提供大規(guī)模蛋白純化、融合標(biāo)簽蛋白純化、無(wú)標(biāo)簽蛋白純化等多種蛋白純化技術(shù)服務(wù)。艾柏森生物蛋白純化服務(wù)包括：1.抗體純化（ProteinA/G）2.工業(yè)級(jí)別大規(guī)模純化服務(wù)3.膜蛋白純化服務(wù)4....

大腸桿菌在表達(dá)蛋白過(guò)程中越來(lái)越少？

大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)是目前應(yīng)用*泛地蛋白表達(dá)系統(tǒng)。它具有：遺傳背景清楚；易于培養(yǎng)和控制；轉(zhuǎn)化操作簡(jiǎn)單；表達(dá)水平高；成本低；周期短等特點(diǎn)。同時(shí)是常用也是經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的蛋白表達(dá)系統(tǒng)，在基因表達(dá)技術(shù)中發(fā)展最早。主要可能有兩種原因，一種是大腸在加入IPTG等誘導(dǎo)劑后大腸停止生長(zhǎng)或者裂解，這時(shí)候我們要考慮蛋白本身對(duì)該菌是有一定毒性的，這時(shí)候我們可以選擇一些采用嚴(yán)緊控制的宿主菌株，比如帶有pLysS的菌株。另外一種原因就是很令人頭疼的了，當(dāng)我們發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)大面積搖瓶中細(xì)菌量逐漸降低甚至培養(yǎng)基回復(fù)到澄...