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納米抗體制備的優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)，您都知道嗎？

近年來(lái)，隨著抗體藥物不斷應(yīng)用于更多治療領(lǐng)域，抗體藥物的治療機(jī)理變得更為復(fù)雜，同時(shí)抗體藥物的結(jié)構(gòu)也變得更為多樣化。納米抗體(nanobodies，Nbs)因具有較小的相對(duì)分子質(zhì)量，其分子結(jié)構(gòu)使其適用于疾病診斷治療等諸多領(lǐng)域，當(dāng)前得到了廣泛的關(guān)注。納米抗體制備特點(diǎn)：與常規(guī)單克隆抗體的VH折疊結(jié)構(gòu)相似，納米抗體的晶體和水溶性結(jié)構(gòu)兩個(gè)β片層組成支架。VHH的CDR3區(qū)較長(zhǎng)，人和小鼠抗體VH的CDR3區(qū)平均長(zhǎng)度為9-12個(gè)氨基酸，VHH的CDR3區(qū)為16-18個(gè)氨基酸?？勺儏^(qū)的擴(kuò)大能夠...

一文看懂什么是蛋白表達(dá)，趕快收藏

蛋白表達(dá)是指用模式生物如細(xì)菌、酵母、動(dòng)物細(xì)胞或者植物細(xì)胞表達(dá)外源基因蛋白的一種分子生物學(xué)技術(shù)。蛋白表達(dá)系統(tǒng)是指由宿主、外源基因、載體和輔助成分組成的體系，通過(guò)這個(gè)體系可以實(shí)現(xiàn)外源基因在宿主中表達(dá)的目的。1、宿主。表達(dá)蛋白的生物體?？梢詾榧?xì)菌、酵母、植物細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞等。由于各種生物的特性不同，適合表達(dá)蛋白的種類也不相同。2、載體。載體的種類與宿主相匹配。根據(jù)宿主不同，分為原核(細(xì)菌)表達(dá)載體、酵母表達(dá)載體、植物表達(dá)載體、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體、昆蟲(chóng)表達(dá)載體等。載體中含有外源基因片段...

多克隆抗體制備實(shí)驗(yàn)方法

多克隆抗體制備主要是哺乳動(dòng)物和禽類，如兔、綿羊、山羊、鼠、馬等。動(dòng)物選擇根據(jù)抗體的用途和量來(lái)決定，也與抗原的性質(zhì)有關(guān)。如需要大量的抗體，則用大動(dòng)物；如要獲得直接標(biāo)記診斷的抗體，則用本種動(dòng)物；如要獲得間接標(biāo)記診斷的抗體，則用異源動(dòng)物；如抗原量少，且難獲得，則用純系小鼠；一般實(shí)驗(yàn)室用抗體，多用兔或鼠。對(duì)于用于診斷的抗體，建議用動(dòng)物通常選年輕、健康的雄性動(dòng)物，懷孕的雌性動(dòng)物一般不用于制備抗體。多克隆抗體制備實(shí)驗(yàn)方法：⒈抗原的制備抗原制備的主要目的在于在免疫動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生強(qiáng)、適當(dāng)?shù)目贵w...

單克隆抗體制備的基本方法

抗體是機(jī)體在抗原刺激下產(chǎn)生的能與該抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白。常規(guī)的抗體制備是通過(guò)動(dòng)物免疫并采集抗血清的方法產(chǎn)生的，因而抗血清通常含有針對(duì)其他無(wú)關(guān)抗原的抗體和血清中其他蛋白質(zhì)成分。一般的抗原分子大多含有多個(gè)不同的抗原決定簇，所以常規(guī)抗體也是針對(duì)多個(gè)不同抗原決定簇抗體的混合物。即使是針對(duì)同一抗原決定簇的常規(guī)血清抗體，仍是由不同B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的異質(zhì)的抗體組成。單克隆抗體制備的基本方法：對(duì)抗原的要求是純度越高越好，尤其是初次免疫所用的抗原。如為細(xì)胞抗原，可取1×107個(gè)細(xì)胞作腹腔免...

單克隆抗體制備是一種均一的免疫球蛋白分子

單克隆抗體制備與多克隆抗體主要的區(qū)別是MAb為單一種B細(xì)胞克隆所產(chǎn)生的一種均一的免疫球蛋白分子。所以MAb是B細(xì)胞克隆的標(biāo)志，是一種*型的抗體，它的特異性是針對(duì)一個(gè)抗原決定簇的。制備單克隆抗體不能用化學(xué)分離的方法從多克隆抗體中去分離純化得到它，而是用分離產(chǎn)生抗體的B細(xì)胞克隆的方法得到它。單克隆抗體制備原理：常用的單克隆抗體是小鼠的單抗，此外也有大鼠的和人源的單抗。人源單抗制備比較復(fù)雜。小鼠單抗的制備通常是使用Balb/c小鼠的B細(xì)胞和它的骨髓瘤細(xì)胞。大鼠的單抗制備通常用Lou...

技術(shù) | 原核蛋白表達(dá)系統(tǒng)

關(guān)于細(xì)菌表達(dá)——由于其性質(zhì)，細(xì)菌表達(dá)系統(tǒng)是一種理想的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)。它通常是生產(chǎn)重組蛋白和抗體的。到目前為止，許多細(xì)菌已經(jīng)被很好地研究。在大量細(xì)菌中，大腸桿菌和枯草芽孢桿菌細(xì)胞系是**的重組蛋白表達(dá)宿主。它們?cè)谶m宜條件下以極低的成本快速?gòu)?fù)制，而表達(dá)水平高，這種特性使其成為大規(guī)模生產(chǎn)的有效和經(jīng)濟(jì)的方式。他們的基因組已*測(cè)序，遺傳背景和代謝途徑****。另外，由于結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，細(xì)菌比真核生物更容易轉(zhuǎn)染。這些期望的特征使表達(dá)過(guò)程更容易和更快速。但在某些方面，優(yōu)勢(shì)也是不利的?？梢栽诩?xì)菌中...

怎么確定大腸桿菌被噬菌體侵染了呢？

噬菌體（phage）是侵襲細(xì)菌的病毒，也是賦予宿主菌生物學(xué)性狀的遺傳物質(zhì)。噬菌體必須在活菌內(nèi)寄生，有嚴(yán)格的宿主特異性，其取決于噬菌體吸附器官和受體菌表面受體的分子結(jié)構(gòu)和互補(bǔ)性。噬菌體是病毒中尤為普遍和分布廣泛的群體。通常在一些充滿細(xì)菌群落的地方，如：泥土、動(dòng)物的腸道里，都可以找到噬菌體。噬菌體分兩種溫和噬菌體和毒性噬菌體前者不會(huì)讓大腸桿菌死亡但是它的基因會(huì)整合到大腸桿菌中做PCR檢測(cè)一下基因可以確定后者直接讓coil.死亡平板涂布培養(yǎng)板子上會(huì)形成噬斑（plaque）可作為判定...