技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES技術(shù)簡介
動物的免疫過程是在集體多種器官和細(xì)胞的參與下完成的,所以即便是用同一種抗原免疫,在同一個免疫周期中,受試動物針對同一抗原產(chǎn)生的抗體也存在極大的差別。以人和小鼠為例,機(jī)體內(nèi)存在有IgG, IgA, IgM, IgE 和IgD五種亞型的抗體,其中IgG依二硫鍵的位置不同又分為四個輕微差異的亞型,稱為同型。在一些免疫學(xué)試驗(yàn)中,為了觀察受試動物免疫反應(yīng)所處的階段,常常需要以受試動物產(chǎn)生的主體抗體亞型為線索,對特定亞型的抗體實(shí)現(xiàn)捕獲或標(biāo)記,同時無需專一性的識別針對特定抗原的抗體,這就是所謂的抗專一亞型抗體,它是抗體亞型鑒定的基礎(chǔ)材料。
服務(wù)組合
服務(wù)項(xiàng)目 (Service Items) | 周期(月) Time(months) | 客戶提供 (Start point) | ||||||||
純化的單一亞型抗體 purified single isotype antibodies | 混合抗體(血清) mixed antibodies (serum) | 原核表達(dá)從頭制備 Prokaryotic proteins synthesis de novo | 真核表達(dá)從頭制備 Eukaryotic proteins synthesis de novo | |||||||
抗原制備 antigens preparation | cDNA合成 cDNA synthesis | 1~2 | 另議,時間與價(jià)格均不包含在以下信息中 | |||||||
載體構(gòu)建 Vector construction | √ | √ | √ | √ | ||||||
分離特定亞型并純化 Isolating single isotype antibodies and purification | √ | |||||||||
蛋白表達(dá)與純化 Protein expression & purification | √ | √ | ||||||||
酶切回收 Enzyme treatment and recovering | √ | √ | √ | √ | ||||||
免疫階段 Immunization | 免疫5只小鼠或兩只兔子 Immunized 5 mice or 2 rabbits | 1.5 | √ | √ | √ | √ | ||||
ELISA效價(jià)檢查 ELISA titer check | √ | √ | √ | √ | ||||||
細(xì)胞融合與篩選 Fusion & Screening | 1.5 | √ | √ | √ | √ | |||||
同家族免疫球蛋白正向復(fù)篩(亞克隆階段) Same isotype immunoglobulin positive screening (subcloning) | √ | √ | √ | √ | ||||||
腹水生產(chǎn)(3只小鼠) Ascites production (Injection on 2 mice) | 0.5 | √ | √ | √ | √ | |||||
非同家族免疫球蛋白負(fù)篩 Different isotype immunoglobulin negative screening | 0.5 | √ | √ | √ | √ | |||||
腹水生產(chǎn)(5只小鼠) Ascites production (Injection on 3 mice) | 1 | √ | √ | √ | √ | |||||
純化與檢測 Purification and detection | 0.5 | √ | √ | √ | √ | |||||
總周期(月) Total lead time(months) | 4~6 | 6~8 | 4~6 | 6~8 | 5~7 | 6.5~8.5 | >6 | >8 |
注:
請慎重考慮周期事宜,以上時間僅為理想條件下短周期;
為了縮短試驗(yàn)周期建議考慮自行提供抗原直接免疫做起;
免疫環(huán)節(jié)設(shè)立驗(yàn)收節(jié)點(diǎn),效價(jià)合格,取脾臟,效價(jià)不合格,終止實(shí)驗(yàn);
抗體庫構(gòu)建步驟啟動之前,至少支付此步驟的50%全款;完成項(xiàng)目,支付尾款。
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