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噬菌體展示系列之抗體親和力成熟

近年來(lái)，隨著抗體藥物的廣泛上市，抗體已經(jīng)取代基因治療成為生物制藥領(lǐng)域的主要生力軍。而抗體在疾病診斷、治療和預(yù)防方面的作用很大程度上取決于其親和力的高低，隨著抗體工程技術(shù)的不斷發(fā)展，如何提高抗體親和力已成為抗體工程的難題之一。圍繞這一問(wèn)題人們已經(jīng)從不同的角度展開(kāi)了研究，例如，提高抗體庫(kù)的質(zhì)量、增加抗體庫(kù)的多樣性、進(jìn)行抗體重鏈或輕鏈的替換以及點(diǎn)突變有目的進(jìn)行氨基酸替換等都能不同程度地提高抗體親和力?？贵w親和力表示抗體與抗原結(jié)合能力的大小?？贵w親和力成熟是指機(jī)體正常存在的一種免疫功...

轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)你還在傻傻分不清？

一、什么是轉(zhuǎn)染?轉(zhuǎn)染(transfection)是真核細(xì)胞主動(dòng)或被動(dòng)導(dǎo)入外源DNA片段而獲得新的表型的過(guò)程。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為兩大類，一類是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染，一類是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染（永jiu轉(zhuǎn)染）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個(gè)宿主細(xì)胞中可存在多個(gè)拷貝數(shù)，產(chǎn)生高水平的表達(dá)，但通常只持續(xù)幾天，多用于啟動(dòng)子和其它調(diào)控元件的分析。一般來(lái)說(shuō)，超螺旋質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率較高，在轉(zhuǎn)染后24-72小時(shí)內(nèi)（依賴于各種不同的構(gòu)建）分析結(jié)果，常常用到一些報(bào)告系統(tǒng)如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來(lái)幫...

【行業(yè)動(dòng)態(tài)】CAR-T細(xì)胞療法最新研究進(jìn)展！

CAR-T(ChimericAntigenReceptorT-CellImmunotherapy)，即嵌合抗原受體T細(xì)胞免疫療法。該療法是一種出現(xiàn)了很多年但近幾年才被改良使用到臨床中的新型細(xì)胞療法。在急性白血病和非霍奇金淋巴瘤的治療上有著顯著的療效，被認(rèn)為是最有前景的腫瘤治療方式之一。正如所有的技術(shù)一樣，CAR-T技術(shù)也經(jīng)歷一個(gè)漫長(zhǎng)的演化過(guò)程，正是在這一系列的演化過(guò)程中，CAR-T技術(shù)逐漸走向成熟這種新的治療策略的關(guān)鍵之處在于識(shí)別靶細(xì)胞的被稱作嵌合抗原受體（chimerica...

安諾倫代理ACRO品牌產(chǎn)品——優(yōu)質(zhì)蛋白供應(yīng)商

ACROBiosystems公司是一個(gè)具有全球范圍影響力的生物技術(shù)lingdao品牌，其運(yùn)營(yíng)包擴(kuò)了位于北美、歐洲和亞洲的數(shù)家公司，主要為生命科學(xué)研究、生物制藥與疫病診斷等行業(yè)提供產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)和臨床應(yīng)用等解決方案，同時(shí)致力于在蛋白組學(xué)、藥物發(fā)現(xiàn)和細(xì)胞治療等領(lǐng)域推廣面向工業(yè)化和臨床轉(zhuǎn)化的技術(shù)和產(chǎn)品。ACROBiosystems的業(yè)務(wù)遍及全球60多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，并通過(guò)在中國(guó)、英國(guó)等世界范圍的不同時(shí)區(qū)設(shè)立分支機(jī)構(gòu)以服務(wù)于當(dāng)?shù)乜蛻襞c經(jīng)銷商。ACROBiosystems中國(guó)公司成立于2...

多克隆抗體是由多個(gè)抗原決定簇組成的

多克隆抗體通常是由多個(gè)抗原決定簇組成的，由一種抗原決定簇刺激機(jī)體，由一個(gè)B淋巴細(xì)胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體（MonoclonalAntibody）。由多種抗原決定簇刺激機(jī)體，相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體，機(jī)體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體；除了抗原決定簇的多樣性以外，同樣一種抗原決定簇，也可刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體。抗原刺激機(jī)體，產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng)，由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特...

噬菌體的分離與純化

實(shí)驗(yàn)原理噬菌體感染宿主細(xì)胞后，其DNA(或RNA)在細(xì)胞體內(nèi)進(jìn)行復(fù)制、轉(zhuǎn)錄，相關(guān)基因表達(dá)，裝配成完整的噬菌體顆粒，最后裂解宿主細(xì)胞或通過(guò)擠出方式從宿主細(xì)胞(宿主細(xì)胞不被殺死，如M1噬菌體)中釋放出來(lái)。因此，①在液體培養(yǎng)基中可使渾濁的菌懸液變?yōu)榍辶粱蜉^清亮。利用噬菌體的這種特性，在樣品中加入敏感菌株與液體培養(yǎng)基混合后培養(yǎng)，噬菌體便能大量增殖，釋放，從而可分離到特定的噬菌體。②在有宿主細(xì)菌生長(zhǎng)的軟瓊脂平板上，噬菌體可裂解細(xì)菌或限制被染細(xì)菌的生長(zhǎng)，形成透明的或渾濁的空斑，亦稱噬菌斑...

【干貨分享】細(xì)胞轉(zhuǎn)染攻略

轉(zhuǎn)染（Transfection），是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉(zhuǎn)染目前已成為實(shí)驗(yàn)室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。一轉(zhuǎn)染的類型1）根據(jù)導(dǎo)入的核酸存在于宿主細(xì)胞的時(shí)間長(zhǎng)短，可以分為瞬轉(zhuǎn)和穩(wěn)轉(zhuǎn)。2）根據(jù)轉(zhuǎn)染方式可以分為化學(xué)，生物，物理方法。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法簡(jiǎn)單快捷且不需要其他儀器輔助的綜合考慮，一般是實(shí)驗(yàn)室的常客，所以接下來(lái)先給大家介紹細(xì)胞轉(zhuǎn)染常用的方法-脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的原理和操作步驟。二脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法...

技術(shù)服務(wù)|大腸桿菌蛋白表達(dá)系統(tǒng)定制服務(wù)

大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)是基因表達(dá)技術(shù)中發(fā)展最早、應(yīng)用*且最為經(jīng)濟(jì)實(shí)惠的經(jīng)典表達(dá)系統(tǒng)。利用該系統(tǒng)表達(dá)重組蛋白具有許多*性:細(xì)胞遺傳背景清楚、目的基因表達(dá)水平高、培養(yǎng)周期短、純化方便、穩(wěn)定性好、抗污染能力強(qiáng)、易于放大和適用于多種屬蛋白的表達(dá)但是仍然存在著表達(dá)量低、蛋白活性低、易形成包涵體和含有內(nèi)毒素等問(wèn)題。大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)簡(jiǎn)介：1.代謝途徑和基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制比較清楚全基因組測(cè)序，共有4405個(gè)開(kāi)放性閱讀框2.基因克隆表達(dá)系統(tǒng)成熟完善繁殖迅速，培養(yǎng)簡(jiǎn)單，操作方便，遺傳穩(wěn)定。3.培養(yǎng)周期短...